응용미생물학 실험 – 미생물 배지의 제조 및 멸균

배지의 특성과 제조방법을 알고, 배지를 멸균하는 목적과 방법에 대해 알아보기 위해 실험을 진행하였다.

1. 배지 (Culture media)
   미생물 배지 또는 동식물세포를 생육시키기 위한 여러 종류의 영양원이 들어 있는 혼합물. 배지의 조성에 따라 합성배지, 반합성배지, 복합배지로 분류할 수 있다.

• 합성배지(Synthetic media) : 화학조성이 명확한 당류, 아미노산, 핵산, 비타민, 염류를 사용하여 만든 배지 (ex. 포도당(glucose), 염화마그네슘 등..)
• 복합배지(Complex media) : 화학조성의 정확히 알려지지 않은 자연 화합물을 사용하여 만든 배지 (ex. yeast extract, peptone, corn steep solid)

• 배지 구성 영양분
  탄소원 : glucose, sucrose, lactose
  질소원 : 암모니아, NO3-의 염류, yest extract, peptone
  무기염류 : K, Mg, P, S, Na, Cl 등이 함유된 무기염류
  미량성분 : 핵산, 아미노산, 비타민 등

1. 배지의 멸균

• 멸균 (Sterilization)
  증식능력이 있는 미생물이나 곰팡이 등이 존재하지 않는 상태(무균상태)로 만드어 내는 과정

• 습윤 멸균법
• 건열 멸균법
• 여과 멸균법

메일라드 반응 (Maillard reaction)
환원당과 아미노 화합물(아미노산, 펩타이드 및 단백질)을 가열했을 때 등에 보이는, 갈색 물질을 만들어 내는 반응. 갈변현상이라고도 한다.
아미노카르보닐(aminocarbonyl) 반응의 일종으로, 갈색 물질을 생성하는 대표적인 비효소적 반응이다.

실험방법

1. 메스실린더에 증류수 100ml을 맞춘다.
2. media bottle에 100ml을 옮기고, 눈금을 표시한다.
3. 저울의 전원을 켜고 dish를 올려 영점을 맞춘다.
4. 각 배지조성을 농도에 맞게 잰 후 bottle에 배지를 녹인다.
5. 배지성분을 완전히 녹인 후 총 volume(100ml)을 맞춘다.
6. 멸균을 한다.

토의 : 섞었을 때는 무색이나, 합쳐서 멸균하면 메일라드 반응으로 인해 노란색으로 바뀐다. 탄소원이 Carbonyl기와 질소원의 amino기가 고온고압에서 축합반응을 하는 것을 melanoidine을 생성하는데 이것은 갈색을 띠기 때문에, 따로 멸균 후 식혀서 합쳐야 한다. yeast extract는 효모를 말려서 갈아 만든 것으로 미생물이 자라기 좋은 배지이다. 멸균을 할 때에는 뚜껑을 살짝 열고 호일로 완벽하게 차단하기 위해 감싼다.

분자생물학을 공부하고 있습니다.
실험하고 공부하는 것을 공유해도 괜찮을까요??